安捷倫液相色譜儀作為高效分離分析的核心設備，在醫藥、環境、食品等領域應用廣泛。其運行穩定性直接決定檢測數據的準確性與可靠性，而柱壓高、柱壓不穩定、峰分叉是使用過程中最易出現的三類故障。本文結合安捷倫液相色譜儀的結構特性與實際應用經驗，深入剖析三類故障的核心成因，并提供系統的排查與解決方法，為實驗室人員提供實操性指導。
一、柱壓高問題：成因與解決策略
正常情況下，安捷倫液相色譜儀的柱壓會保持在相對穩定的范圍（具體數值因色譜柱型號、流動相黏度而異，如C18柱在甲醇-水體系中通常為8-12MPa）。當柱壓超過正常范圍30%以上時，可判定為柱壓高故障，需從系統堵塞、色譜柱污染、流動相異常三方面排查。
首先，系統流路堵塞是柱壓高的首要誘因。進樣閥、在線過濾器、色譜柱入口篩板是易堵塞部位。排查時可按“由前至后"原則拆分系統：先斷開色譜柱入口，用純甲醇或乙腈以1.0mL/min流速沖洗流路，若柱壓恢復正常，說明堵塞位于色譜柱前端；若壓力仍高，再斷開進樣閥出口，沖洗進樣閥至在線過濾器段，若壓力下降，需拆解在線過濾器更換濾膜（通常為0.22μm有機相濾膜）；若進樣閥堵塞，需用專用清洗液超聲清洗閥芯。
其次，色譜柱污染或堵塞是柱壓高的核心原因。樣品中的顆粒物、強保留組分易沉積在柱入口或孔隙中。輕度污染可通過“反向沖洗"解決：將色譜柱反向連接，用甲醇-乙腈（1:1）混合溶劑以0.5mL/min流速沖洗2-4小時，利用反向流動沖開前端堵塞的顆粒物；若為強保留污染物（如蛋白質、色素），需根據污染物性質選擇清洗溶劑，如堿性污染物用5%氨水-甲醇溶液沖洗，酸性污染物用1%甲酸-乙腈溶液沖洗，沖洗后需用純溶劑過渡平衡。若沖洗后柱壓仍高，需更換柱入口篩板（需匹配色譜柱型號，如4.6mm內徑柱對應4.6mm篩板）。
最后，流動相配置不當易被忽視。未過濾的流動相含顆粒物，會直接堵塞流路；含鹽流動相未及時清洗易析出鹽結晶，尤其在柱溫較低時。解決方法為：所有流動相必須經0.22μm濾膜過濾，水相流動相需現配現用；實驗結束后，用5%甲醇水溶液沖洗含鹽流動相流經的流路30分鐘，再用純甲醇沖洗至基線穩定。
二、柱壓不穩定問題：波動溯源與校準方案
柱壓波動超過±0.5MPa時，會導致保留時間漂移，影響定性準確性。故障根源主要集中在輸液系統、氣泡干擾、色譜柱狀態三方面。
輸液系統異常是常見誘因。安捷倫泵的單向閥磨損、密封圈老化會導致輸液脈沖，表現為柱壓周期性波動。排查時可觀察壓力曲線：若呈周期性尖峰波動，需拆解單向閥，用異丙醇超聲清洗閥芯（避免用硬物刮擦），若磨損嚴重需更換單向閥組件；若壓力呈無規律波動，可能是泵密封圈老化，需檢查密封圈是否滲漏，及時更換同型號密封圈。此外，比例閥故障會導致流動相混合比例波動，需用校準工具對比例閥進行流量校準。
氣泡干擾是易被忽略的因素。流動相脫氣、流路中進入空氣會導致柱壓驟升驟降。解決時需“分步脫氣"：新配置流動相先經超聲脫氣20分鐘，再通過儀器在線脫氣機脫氣；若流路已進氣泡，需關閉泵，打開排液閥，手動推動柱塞桿排出氣泡，再以低流速（0.2mL/min）運行5分鐘，待壓力穩定后逐漸升高流速。
色譜柱填充不均勻或柱床塌陷也會導致壓力波動。新柱使用前未充分平衡、驟升流速易造成柱床紊亂。處理方法為：新柱用純甲醇以0.3mL/min流速平衡1小時，再逐步升高流速至設定值；若柱床塌陷，需更換色譜柱，日常使用中需避免流速驟變（每次調整不超過0.2mL/min）、柱溫驟升驟降（升溫速率≤5℃/min）。
三、峰分叉問題：分離效能異常的排查路徑
峰分叉表現為單一組分出現兩個或多個重疊峰，核心原因是色譜柱效能下降、樣品預處理不當或系統污染。需按“樣品-色譜柱-系統"的順序排查。
樣品預處理不足是首要因素。樣品中的雜質與目標組分共洗脫、樣品溶解性差形成沉淀，都會導致峰分叉。解決方法為：優化樣品前處理流程，如用固相萃?。⊿PE）去除雜質，選擇與流動相匹配的溶劑溶解樣品（避免用強極性溶劑溶解非極性樣品）；若為堿性樣品（如生物堿），可在流動相中加入0.1%三乙胺抑制拖尾與分叉。
色譜柱問題是峰分叉的關鍵。柱入口篩板堵塞會導致樣品在柱入口擴散不均，表現為峰前端分叉；色譜柱鍵合相流失或柱效下降，會導致組分分離能力下降。排查時先更換柱入口篩板，若分叉消失則為篩板問題；若未改善，需檢測柱效（如用萘標樣測定C18柱理論塔板數），若柱效下降超過30%，需更換色譜柱。日常需避免將色譜柱暴露在pH（<2或>8）條件下，防止鍵合相流失。
系統污染或死體積過大也會導致峰分叉。進樣針污染、進樣閥殘留會引入雜質峰，表現為分叉；色譜柱與檢測器連接管路過長、接頭松動會產生死體積，導致峰展寬分叉。解決方法為：用甲醇超聲清洗進樣針（50℃，20分鐘），進樣閥用10%硝酸溶液沖洗（針對金屬殘留）；更換短路徑連接管（如10cm長、0.17mm內徑的PEEK管），擰緊接頭確保無滲漏，減少死體積。
四、預防措施：延長儀器壽命的核心要點
故障預防優于事后維修。日常使用中需做好三方面工作：一是樣品管理，所有樣品必須經0.22μm濾膜過濾，復雜樣品需預處理后再進樣；二是色譜柱維護，實驗結束后及時沖洗，長期不用時用甲醇-乙腈（1:1）封存，避免柱內干涸；三是定期校準，每季度對泵的流量準確性、檢測器波長進行校準，每年更換單向閥、密封圈等易損件。
綜上，安捷倫液相色譜儀的三類常見故障均有明確的成因與解決路徑。排查時需遵循“由簡至繁、由前至后"的原則，結合壓力曲線、峰形變化等細節精準定位問題。通過科學的故障處理與日常維護，可有效提升儀器運行穩定性，保障檢測數據的準確性。
